Tiếp nối chuỗi sự kiện từ Despicable Me 3 (2017), Gru (lồng tiếng bởi Steve Carrell) giờ đây đã từ bỏ con đường tội lỗi, hạn chế tham gia vào các hoạt động phi pháp. Gia đình anh đã phát triển, bao gồm vợ Lucy Wilde, ba cô con gái nuôi Margo, Edith, Agnes, và thành viên mới nhất – cậu con trai đầu lòng Gru Junior.
Tuy nhiên, cuộc sống yên bình của gia đình Gru bị đe dọa khi Maxime Le Mal (lồng tiếng bởi Will Ferrell), kẻ thù cũ của anh, vượt ngục thành công. Maxime lên kế hoạch trả thù và giải quyết mối thù xưa với Gru, được hỗ trợ bởi người yêu Valentina của hắn.
Đứng trước mối đe dọa này, Gru buộc phải đối mặt với kẻ thù để bảo vệ gia đình và đội quân Minions trung thành của mình. Cuộc đối đầu này hứa hẹn sẽ là một thử thách lớn, đòi hỏi Gru phải vận dụng tất cả kỹ năng và sự thông minh của mình để bảo vệ những người thân yêu.